时间:2019-09-17 11:21
来源:立迪医学
9月10日,立迪生物有幸邀请到了小默生物创始人黄林峰博士分享了《“个性化”RNAi高通量筛选技术在生物医学研究中的应用》的报告。黄林峰博士现任香港城市大学生物医学系助理教授,博士生导师。师从小核酸领域的创始人Sir David Baulcombe。之后在美国波士顿儿童医院、哈佛医学院Judy Lieberman研究组从事博士后研究。 CRISPR是近年来发现的一类由RNA引导靶向切割DNA的技术,因为它的易操作性和高效切割,近年来已成为用于肿瘤药物靶点发现的独特工具,为药物耐药性基因研究提供了一种有效的方法,然而,CRISPR技术本身也存在一些缺陷,如不同序列效率差异大,需要引入外源Cas9 蛋白到真核细胞才能起作用。为了有效解决CRISPR技术面临的这些问题,让更多患者获益,来自小默生物的黄林峰教授团队经过多年的技术攻关,开发出了具有里程碑意义的原核小核酸(‘pro-siRNA’,prokaryotic siRNA)技术,该技术是目前世界上第一个也是唯一一个利用基因工程手段,可以在大肠杆菌中大规模、经济地生产小核酸的方法。立迪生物已经建立了一系列特殊耐药且与PDX配对的细胞系,结合原核小核酸技术可以个性化的筛选靶向基因,找出耐药机理相关的关键基因,见附表。 RNAi的机制是长链双 RNA(double-stranded RNA,dsRNA)被剪切为siRNA后,与蛋白质结合形成siRNA诱导干扰复合体(siRNA induced interference complex, RISC),RISC 再与特定mRNA结合,使mRNA 降解,从而精准地抑制基因的表达,是生物医学研究中不可或缺的工具。 RNAi和CRISPR的区别(源自黄教授PPT) 原核小核酸(‘pro-siRNA’,prokaryotic siRNA)技术是目前世界上第一个也是唯一一个利用基因工程手段,可以在大肠杆菌中大规模、经济地生产小核酸的方法。因是细菌工厂生产的小核酸,固命名为原核小核酸(‘pro-siRNA’,prokaryotic siRNA)。它不仅具有脱靶率低、假阳性率低等特点,还可以在真核细胞中非常高效和特异地抑制基因的表达。基于原核小核酸技术,可以针对任何物种、任何重要疾病的细胞模型,进行定制的RNAi文库生产和高通量筛选,系统性地发现致病相关基因,继而可以进一步探索以致病基因为靶标的精准治疗。同时,结合高内涵筛选技术(High content screen),可以实现原核小核酸技术在肿瘤和感染研究中的高效应用。 Pro-siRNA和其他功能基因筛选技术的区别(源自黄教授PPT) 为了推动这一技术平台的成果转化,立迪生物与小默生物将成立“立迪-小默生物联合实验室”,旨在运用原核小核酸筛选肿瘤药物靶点,进行药物耐药性基因的研究,为药企提供更先进的专业化服务平台。